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紫外可見分光光度計常見問題解答
更新時間:2016-01-06   點擊次數(shù):5859次

一、光源部分:

    (1)鎢燈不亮;

原因:1.鎢燈燈絲燒斷(此種原因幾率zui高);

檢查:鎢燈兩端有工作電壓,但燈不亮;取下鎢燈用萬用表電阻檔檢測。

解決方法:更換新鎢燈;

原因2. 沒有點燈電壓;

檢查: 保險絲被熔斷;

解決方法:更換保險絲,(如更換后再次燒斷則要檢查供電電路);

   (2)氘燈不亮;

    原因:1氘燈壽命到期(此種原因幾率zui高);

    檢查:燈絲電壓、陽極電壓均有,燈絲也可能未斷(可看到燈絲發(fā)紅);

    解決辦法:更換氘燈;

    原因:2.氘燈起輝電路故障;

    檢查:氘燈在起輝的過程中,一般是燈絲先要預(yù)熱數(shù)秒鐘,然后燈的陽極與陰極間才可起輝放電,如果燈在起輝的開始瞬間燈內(nèi)閃動一下或連續(xù)閃動,并且更換新的氘燈后依然如此,有可能是起輝電路有故障,燈電流調(diào)整用的大功率晶體管損壞的幾率zui大。

    解決辦法:需要專業(yè)人士修理;

    二.信號部分:

    (1)沒有任何檢測信號輸出;

    原因:沒有任何光束照射到樣品室內(nèi);

    檢查:將波長設(shè)定為530nm,狹縫盡量開到zui寬檔位,在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處,觀察白紙上有無綠光斑影像;

    解決辦法:檢查光源鏡是否轉(zhuǎn)到位?雙光束儀器的切光電機是否轉(zhuǎn)動了(耳朵可以聽見電機轉(zhuǎn)動的聲音)?

    (2)樣品室內(nèi)無任何物品的情況下,全波長范圍內(nèi)基線噪聲大;

    原因:光源鏡位置不正確、石英窗表面被濺射上樣品;

    檢查:觀察光源是否照射到入射狹縫的中央?石英窗上有無污染物?

    解決辦法:重新調(diào)整光源鏡的位置,用乙醇清洗石英窗;

    (3)樣品室內(nèi)無任何物品的情況下,僅僅是紫外區(qū)的基線噪聲大;

    原因:氘燈老化、光學(xué)系統(tǒng)的反光鏡表面劣化、濾光片出現(xiàn)結(jié)晶物;

    檢查:可見區(qū)的基線較為平坦,斷電后打開儀器的單色器及上蓋,肉眼可以觀察到光柵、反光鏡表面有一層白色霧狀物覆蓋在上面;如果光學(xué)系統(tǒng)正常,zui大的可能是氘燈老化,可以通過能量檢查或更換新燈方法加以判斷;

    解決辦法:更換氘燈、用火棉膠粘取鏡面上的污物或用研磨膏研磨濾光片(注意:此種技巧需要有一定維修經(jīng)驗者來實施);

    (4)樣品室放入空白后做基線記憶,噪聲較大,紫外區(qū)尤甚;

    原因:比色皿表面或內(nèi)壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白樣品對紫外光譜的吸收太強烈,使放大器超出了校正范圍;

    檢查:將波長設(shè)定為250nm,先在不放任何物品的狀態(tài)下調(diào)零,然后將空比色皿插入樣品道一側(cè),此時吸光值應(yīng)小于0.07Abs;如果大于此值,有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿;同樣方法也可判斷空白溶液的吸光值大??;

    解決辦法:清洗比色皿,更換空白溶液;

    (5)吸光值結(jié)果出現(xiàn)負值(zui常見);

    原因:沒做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液;

    檢查:將參比液與樣品液調(diào)換位置便知;

    解決辦法:做空白記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液;

    (6)樣品信號重現(xiàn)性不良;

    原因:排除儀器本身的原因外,zui大的可能是樣品溶液不均勻所致;在簡易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時重復(fù)推拉不在同一個位置上;

    檢查:更換一種穩(wěn)定的試樣判定;

    解決辦法:采取正確的試樣配置手段;修理推拉式樣品架的定位碰珠;

    (7)做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個大的負脈沖;

    原因:掃描速度設(shè)置得過快,信號在讀取時,誤將濾光片或光源鏡的切換當(dāng)做信號讀取了;

    檢查:改變掃描速度;

    (8)做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個長時間段的負值或滿屏大噪聲;

    原因:濾光片飼服電機“失步”,造成檔位錯位,國產(chǎn)電機尤甚;

    檢查:重新開機有可能回復(fù),或打開單色器對照波長與濾光片的相對位置來檢查(注意:打開單色器時要保護檢測器不被強光刺激);

    解決辦法:更換飼服電機;

    (9)樣品出峰位置不對;

    原因:波長傳動機構(gòu)產(chǎn)生位移;

    檢查:通過氘燈的656.1nm的特征譜線來判斷波長是否準(zhǔn)確;

    解決辦法:對于儀器而言處理手段相對簡單,使用儀器固有的自動校正功能即可;而對于相對簡單的儀器,這種調(diào)整則需要專業(yè)人員來進行了;

    (10)信號的分辨率不夠,具體表現(xiàn)是:本應(yīng)疊加在某一大峰上的小峰無法觀察到;

    原因:狹縫設(shè)置過窄而掃描速度過快,造成檢測器響應(yīng)速度跟不上,從而失去應(yīng)測到的信號;按常理,一定的狹縫寬度要對應(yīng)一定范圍的掃描速度;或者狹縫設(shè)置得過寬,使儀器的分辨率下降,將小峰融合在大峰里了。

    檢查:放慢掃描速度看一看或?qū)ⅹM縫設(shè)窄;

    解決辦法:將掃描速度、狹縫寬窄、時間常數(shù)三者擬合成一個*化的條件;

    (11)當(dāng)儀器波長固定在某個波長下時,吸光值信號上下擺動,特別是測量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開關(guān)式的簡易儀器;

    原因:開關(guān)觸點因長期氧化所致造成接觸不良;

    檢查:用手加重力量按琴鍵時,吸光值隨之變化;

    解決辦法:用金屬活化劑清洗按鍵觸點即可;

    (12)儀器零點飄忽不定,主要反映在簡易儀器上;

    原因:在簡易儀器中,零點往往是通過電位器來調(diào)整,這種電位器一般是炭膜電阻制作的,使用久了往往造成接觸不良;

    解決辦法:更換電位器;

還有一點補充一下,如果是PC連接UV時,同志們一定注意接口板別不小心被擊穿,一定要關(guān)機后拔插.若可見部分穩(wěn)定性不好,有可能是鎢燈的供電電壓不穩(wěn),一般鎢燈電源是穩(wěn)壓電路

(13)在使用過程中,出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零,同時伴有圖線記錄基線位置偏高。
    可能原因:
        ①光電倍增等老化,性能降低;
        ②信號處理板可能發(fā)生故障;
        ③前置放大版出現(xiàn)故障,引起反饋量增大。
解決辦法:
    ①開機通電,先做記錄故障曲線,再與原始記錄的標(biāo)準(zhǔn)曲線對照,找出異同點,并作一下定性定能分析。然后用一只同型號規(guī)格的新光電倍增管替換機上的光電管,再開機實驗,結(jié)果記錄出來的圖線并沒有什么變化,由此證明光電倍增管沒有老化變質(zhì)。
    ②進一步檢查信號處理板,未發(fā)現(xiàn)信號處理板各元器件損壞,對影響靈敏度有關(guān)的電位器檢測,結(jié)果測得數(shù)據(jù)正常,這說明信號處理板*。
    ③由 于對以上分析,故障發(fā)生在前置級放大板可能性很大。應(yīng)采用模擬測試對前置放大板進行測量,先利用直流穩(wěn)壓電源,把各供電電源加上,使其電路單工作,用信 號發(fā)生器發(fā)出的信號加到輸入端。再用示波器接在輸出端測量輸出信號,將輸入信號與輸出信號對比,結(jié)果波形相同,說明電路*。用相同方法對一個帶驅(qū)動 器的開關(guān)管測量,輸入端加入信號后,用示波器未能測出輸出端信號,判斷開關(guān)管壞,換上同一型號規(guī)格的開關(guān)管,恢復(fù)正常。

(14)儀器掃描樣品時,顯示一條直線。
    可能原因:軟件出現(xiàn)故障。
    解決辦法:退出操作系統(tǒng),重新啟動計算機,再次掃描。

(15)
紫外可見分光光度計接通電源后,光源不亮。
    可能原因:
    ①光源燈泡已損壞;
    ②保險管燒壞。
    解決辦法:更換氘燈或鎢燈;更換保險管。

(16)儀器自檢時提示通訊錯誤。
    可能原因:儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒有連接好。
    解決辦法:連接好數(shù)據(jù)線,重新打開儀器和軟件,重新自檢。

(17)自檢時提示波長自檢出錯。
    可能原因:自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。
    解決辦法:關(guān)上儀器樣品室蓋子,重新自檢。

(18)測試過程中提示能量太低。
    可能原因:
      ①光源燈泡使用時間超過壽命期;
      ②樣池中有不透光的東西擋住了光。
    解決辦法:更換光源燈泡;拿走擋光的物品

三、使用技巧

(1)不使用氘燈時如何關(guān)閉氘燈

 

當(dāng)連接儀器時,選擇儀器>配置>保養(yǎng)標(biāo)簽,然后點擊氘燈邊上的燈狀態(tài)框,除去復(fù)選標(biāo)記。只要掃描范圍和固定波長測定不在氘燈的范圍之內(nèi)時,氘燈將處于關(guān)閉狀態(tài)。

 

(2)如何決定所用的通帶

 

選擇測定光譜中zui窄峰的半高度,然后除以10。例如峰的半高度寬是20nm,通帶的優(yōu)選值是2nm。

 

(3)初始化剛完成,使用哪條基線
使用zui后一次存儲的基線。儀器在初始化時不進行基線校正。可掃描一次零線,看基線是否完好,如果可以,就使用存在的基線。儀器在出廠時存儲有基線。如果未進行過基線校正,則使用的是出廠時的基線。

 

(4)如果發(fā)生通訊故障,應(yīng)該檢查哪些項目
 

①檢查在儀器配置屏幕(選擇儀器>配置)中是否選擇了合適的通訊口;
②檢查電纜是否正確,牢固地連接
③檢查儀器的電源是否已經(jīng)打開

 

(5)燈是如何進行準(zhǔn)直的

 

實際上燈并不移動。在初始化時,驅(qū)動燈反光鏡的步進馬達連接有傳感器,當(dāng)檢測器發(fā)現(xiàn)能量zui大時,反饋信號到燈室,步進馬達的傳感器自動記憶此時的反光鏡位置。當(dāng)檢查所有的位置后,反光鏡自動返回到記憶的位置。

 

(6)紫外區(qū)讀數(shù)漂移的原因

 

確認氘燈是否點亮。氘燈的使用時間是否超過了預(yù)期的500h壽命,一旦超過,光強減弱,也許需要更新。此外可檢查夾縫寬度的設(shè)置是否太小。

 

(7)執(zhí)行了自動調(diào)零后儀器處于什么狀態(tài)

 

自動調(diào)零把當(dāng)前固定波長的光度讀數(shù)調(diào)節(jié)為0或者100%,取決于測定的方式。使用自動調(diào)零減去了空白讀數(shù)。通常,在單個固定波長測定時使用自動調(diào)零,如果是多波長測定,應(yīng)該執(zhí)行基線校正。

 

(8)為什么執(zhí)行自動調(diào)零后光譜仍然沒有得到有效的校正

 

因為自動調(diào)零只校正一個點;要校正光譜范圍,需要進行基線校正或精細的基線校正。精細的基線校正應(yīng)該定期進行,一般每月一次,在樣品室中不必放任何容器。

 

(9)基線校正后儀器的狀態(tài)如何?

 

基線校使時儀器在制定得波長范圍內(nèi)的光譜讀數(shù)調(diào)整為零。

 

(10)為什么基線校正不能正常起作用
是否樣品室中放了樣品?基線校正時有三種選擇,可確?;€校正的正常。
①樣品室池架內(nèi)空置(空氣對空氣)。此時校正儀器的基線,特別適合精細的基線校正
②樣品池中放入溶劑,參比側(cè)空置
③樣品和參比池中都放入溶劑
需要確認樣品室的門已經(jīng)關(guān)好。雜散光會影響基線的質(zhì)量。此外,在的波長范圍內(nèi)溶劑和樣品池的材料匹配。

 

(11)夾縫寬改變以后情況如何
多數(shù)場合下(紫外/可見區(qū)),設(shè)置夾縫寬也等于設(shè)置了帶寬,換言之設(shè)置了光譜的分辨率。夾縫寬改變,改變了光束的集合尺寸。在使用微量池和流通池時就要權(quán)衡考慮,增加夾縫寬可增加光通量降低噪聲。但是,使用zui大的夾縫寬,噪聲是降低了,付出的代價是分辨率也隨之降低了。

 

(12)為什么有時在儀器初始化中會出現(xiàn)氘燈能量或波長正確度故障
出現(xiàn)上述現(xiàn)象的原因可能如下。
①樣品盒參比池中有樣品池
②使用某些附件,如池定位裝置、抽吸單元等,沒有坐落在正確的位置上或未準(zhǔn)直。
③如果安裝了抽吸單元,流通池臟了、空了或沒有準(zhǔn)直。
④氘燈的使用時間接近或超過預(yù)期的500h壽命,燈的能量降低乃至不能通過能量檢查,并且由于噪聲增加,使波長正確度的檢查也失敗。此時,換新的燈一切問題迎刃而解。

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